Introducción

El subgénero Agrodiaetus Hübner, [1822], es uno de los grupos de Lepidoptera más controvertidos y difíciles de estudiar, ya que aglutina un buen número de especies que no se diferencian apenas por morfología externa y genitalia. En la Península Ibérica habitan cinco especies del subgénero, Polyommatus (Agrodiaetus) damon ([Denis & Schiffermuller], 1775), P. (A.) fulgens (Sagarra, 1926), P. (A.) ripartii (Freyer, 1830), P. (A.) fabressei (Oberthür, 1910) y P. (A.) violetae (Gómez-Bustillo, Expósito & Martínez, 1979), siendo P. (A.) fulgens, P. (A.) fabressei y P. (A.) violetae, endemismos ibéricos.

P. ripartii, P. fabressei y P. violetae, comparten el mismo patrón morfológico e incluso el mismo número haploide (n=90), si bien existen diferencias cariológicas basadas en el número y tamaño de los macrocromosomas (DE LESSE, 1961a; MUNGUIRA et al., 1995; WIEMERS et al., 2003; LUKHTANOV et al., 2005; LUKHTANOV et al., 2006; VILA et al., 2010). Esta circunstancia ha ocasionado que un buen número de especialistas haya dedicado esfuerzos en aclarar y estudiar este grupo de especies.

Durante décadas se pensó que la presencia-ausencia de un trazo blanco en la cara ventral del ala posterior, separaba P. fabressei de P. ripartii (el primero sin raya y el segundo con raya), por lo que un gran número de publicaciones relativas a estudios faunísticos en la Península Ibérica, se citaba a las dos especies juntas en muchas localidades. A este problema se añadía la existencia de una población aislada de P. fabressei en las Sierras Subbéticas, desde el Macizo de la Sagra hasta la Sierra de Alcaraz y el status incierto durante mucho tiempo de la población más sureña, relativa a P. violetae.

Siguiendo el primitivo esquema, de separar a los ejemplares sin raya como P. fabressei y a los que tenían raya como P. ripartii, en la provincia de Guadalajara se citó a P. ripartii por primera vez en ORTIZ et al. (1977).

La separación de P. fabressei y P. ripartii en dos áreas geográficas bien delimitadas se estableció mediante análisis carilógicos de las poblaciones del norte y centro de la península en MUNGUIRA et al. (1995). Las poblaciones del sur son establecidas como P. violetae y P. fabressei subbaeticus, como subespecie de fabressei en GIL-T. et al. (2005), en base a caracteres morfológicos del imago y estadios preimaginales.

En un posterior trabajo donde combina el estudio del cariotipo y marcadores moleculares (VILA et al., 2010), se establece que P. fabressei subbaeticus es en realidad el mismo taxón que P. violetae, manteniendo el status subespecifico de las poblaciones orientales (P. violetae subbaeticus). En VILA et al. (2010), se establece una distribución alopátrica para los tres taxones, donde P. ripartii habitaría en el norte, P. fabressei el centro y P. violetae el sur de la Península Ibérica. En un reciente estudio genético de las poblaciones europeas de P. ripartii, (DINCA et al., 2013), se concluye que P. ripartii tiene tres linajes bien diferenciados (Europeo occidental, Euroasiático y Balcanes), dos de los cuales habitarían la Península Ibérica (Europeo occidental y Euroasiático), además inhabilita la distribución de los Agrodiaetus ibéricos propuestas anteriormente, ya que entre los ejemplares analizados por ADN, se estudiaron tres ejemplares que han resultado ser de la especie P. ripartii, linaje euroasiático, en plena área de vuelo de P. fabressei, en el Sistema Ibérico, uno en la provincia de Guadalajara y dos en Albarracín (Teruel). Igualmente se encontró un ejemplar de P. fabressei en la Rioja (MONASTERIO-LEÓN et al., 2014) en el área de vuelo de P. ripartii.

En PÉREZ-FERNÁNDEZ (2008), estudiamos el trazo blanco del reverso del ala posterior de los ejemplares de P. fabressei del este de la provincia de Guadalajara, concluyendo que es un carácter muy variable y que la raya se puede presentar en aproximadamente la mitad de los ejemplares en algunas localidades. A pesar de contar con muy pocas observaciones en el oeste de la provincia de Guadalajara (n=13), reseñábamos lo siguiente: “en los ejemplares estudiados nunca encontramos la raya blanca en la cara ventral del ala posterior”. Esta circunstancia nos ofreció indicios de que las poblaciones termófilas del oeste podían diferenciarse de las del este, instaladas mayoritariamente en el piso supramediterraneo. Si bien se trataba de una teoría que no podíamos comprobar sin análisis genéticos.

La distribución más actualizada de estas especies la encontramos en GARCÍA-BARROS et al. (2004) y una compilación de la información conocida sobre su biología, ecología y taxonomía la encontramos en GARCÍA-BARROS et al. (2013), también encontramos detalles de su biología y fotografías de los estadios preimaginales en MUÑOZ- SARIOT (2011).

La planta nutricia citada mayoritariamente en la bibliografía es Onobrychis viccifolia (MUNGUIRA et al., 1997; GARCÍA-BARROS et al., 2013). En MUÑOZ-SARIOT (2011), se cita genéricamente a Onobrychis, sin especificar taxón. Esto se repite en el resto de referencias a nivel nacional, provincial o región, a excepción del trabajo referente a Castilla-León, VICENTE-ARRANZ et al. (2007), donde se cita como nutricias a Onobrychis viccifolia y Onobrychis argentea.

El presente trabajo busca confirmar la presencia de P. ripartii en la provincia de Guadalajara y establecer con mayor precisión el área de distribución de P. fabressei y P. ripartii, además de aportar conocimientos sobre su biología y ecología. Igualmente determinamos la validez del carácter morfológico de la raya blanca del reverso de las alas posteriores para discernir entre ambas especies.

Material y métodos

Para determinar los ejemplares de los muestreos y asignarlos a una u otra especie, se analizó el marcador genético mitocondrial Cytochrome c oxidase subunit I (COXI), tanto de zonas donde la raya blanca nunca aparece como de localidades donde encontramos ejemplares con raya y sin raya en parecidas proporciones. En estas últimas localidades se buscó recolectar ejemplares con y sin raya que se encontrasen juntos (bebedero), esto se logró en Poveda y Rillo de Gallo. En Peralejos se encontraron ejemplares de ambos morfotipos pero de diferentes fechas y en Buenafuente del Sistal solo encontramos ejemplares con raya, si bien por las citas anteriores que manejamos también aparecen sin raya. En la Figura 1 reflejamos las localidades donde se recolectaron ejemplares para su análisis genético.

Se realizó la extracción de DNA genómico de estos ejemplares utilizando el kit Power Plant de Qiagen; a partir de este DNA se hicieron las PCRs utilizando los primers LepF1 (5´ATTCAACCAATCATAAAGATATTGG 3´) y LepR1 (5´TAAACTTCTGGATGTCCAAAAAATCA 3´), que amplifican un fragmento de 658pb. Los pasos de la reacción de PCR fueron los siguientes: 94º, 2 minutos, 35 ciclos (94º, 40 segundos, 54º, 40 segundos, 72º, 1 minuto); un último paso de 4º constante. Estos fragmentos de DNA se purificaron y posteriormente secuenciaron utilizando los mismos “primers” con los que se amplificaron; la secuenciación se realizó en un secuenciador de capilares Abi 3730 utilizando el kit Big Dye Terminator v.3.1. Para asignar los ejemplares a una especie, se compararon las secuencias obtenidas con la base de datos del NCBI. La asignación de los ejemplares a una especie o a otra se realizó mediante un Blast en el Gen Bank.

Asignamos la especie cuando encontramos una homología del 99% o superior, teniendo en cuenta que entre ambas especies hay una homología del 95%.

Los datos faunísticos son una recopilación de diversas fuentes: citas bibliográficas, citas inéditas de Manuel Ortiz y Cecilia Montiel y citas propias inéditas. La asignación a una u otra especie se ha realizado siguiendo la teoría obtenida tras analizar los resultados de los estudios genéticos.

Los muestreos para la obtención de citas se realizaron en dos fases, en primer lugar en primavera (mayo y junio) con el fin de encontrar rodales de Onobrychis floridos (género de plantas del que se alimenta Agrodiaetus en exclusiva en la Península Ibérica) y posteriormente en verano, para buscar imagos o huevos. Para ello se eligieron biotopos adecuados en cuadriculas UTM 10X10 km. en las que P. fabressei o P. ripartii no estaban citados.

Habiéndose encontrado diferencias apreciables en el color de la cara ventral entre ejemplares de ambas especies, hicimos un estudio del color de fondo, utilizando el siguiente método. Se fotografiaron las alas de una en una, a distancia, ángulo e iluminación fijas, mediante cámara Nikon D600, objetivo macro de 60 mm y flash anular Sigma D140 acoplado al objetivo. Todo montado sobre trípode para evitar que una mínima variación del ángulo de iluminación pudiera modificar el resultado, ya que la estructura de las escamas de las alas hace que el color varíe considerablemente con una mínima inclinación del ángulo de visión e iluminación. Posteriormente, con el programa de fotografía Photoshop, se seleccionó un pequeño cuadrado sin puntos en la zona discal. Este cuadrado se desenfoco mediante el comando desenfoque de superficie con los parámetros de radio 30 pixeles y umbral 50 niveles, posteriormente se pinchó con la paleta de color para obtener el valor de cada color RGB. Se muestra el proceso con los ejemplares 13/2016 y 14/2016 en la Figura 2.

Estadísticamente hemos hallado para los componentes de color RGB, la media, varianza, desviación típica y t de student con EXCEL 2013. Para ello utilizamos los resultados RGB de 34 ejemplares fotografiados (Figura 5), eliminando el nº 4/2015 por estar muy desgastado.

Para el estudio de la biología y ecología de las etapas preimaginales de P. fabressei, algunas de ellas inéditas, se eligieron tres rodales de plantas habitados por la especie, todos del este de la provincia, donde no habita P. ripartii, en las localidades de Arbancón y Cogolludo.

Para la determinación de la planta nutricia, se estudiaron doce poblaciones en el oeste de la provincia, desde los 750 m. hasta los 1.480 m. y seis en el este, desde los 980 m. hasta los 1.500 m., todas habitadas por estas especies. Para la identificación de las plantas hemos seguido a TALAVERA et al. (2000), además de consultar a botánicos especialistas colaboradores del Real Jardín Botánico de Madrid (CSIC).

Localidades del oeste de Guadalajara: Villacadima, [30TVL86], a 1.330 m., Espinosa de Henares, a 750 m., [30TVL92], Cogolludo, a 870 m., [30TVL93], Arbancón, a 880 m., [30TVL93], Alcorlo, a 920 m., [30TVL94], Hijes, a 1.480 m., [30TVL97], Medranda, a 850 m., [30TWL03], Huermeces del Cerro, a 900 m., [30TWL14], Riofrío del Llano, a 1.060 m., [30TWL15], Madrigal, a 980 m., [30TWL16], Imón, a 970 m., [30TWL25], Tordelrabano, a 1.010 m., [30TWL26].

Localidades del este de Guadalajara: Zaorejas, a 980 m., [30TWL71], Terzaga, a 1.240 m., [30TWL90], Peñalén, [30TWK79], Poveda de la Sierra, a 1.280m., [30TWK89], Peralejos de las Truchas, a 1.380 m., [30TWK99], Checa, a 1.500 m., [30TXK07].

Para el estudio del huevo y la oruga en L1 de P. fabressei, se recurrió a la macrofotografía tradicional y a la fotografía con microscopio electrónico de barrido (SEM). Las macrofotografías se realizaron con una cámara réflex de 24 megapíxeles, que permite un recorte importante sin pérdida de calidad, con un objetivo macro de 60 mm, tres tubos de extensión y flash anular.

Las fotos con SEM se realizaron con un microscopio electrónico de barrido JEOL 5600V, usando un voltaje de aceleración de 20Kv y una distancia de trabajo de 20mm. Las muestras se montaron en stubs con adhesivo de grafito conductor y se metalizaron con oro en un BIO-RAD SC 502.

Resultados

RESULTADOS DE LA SECUENCIA DEL MARCADOR CYTOCHROME C OXIDASE SUBUNIT I (COXI)

En la Tabla 1, relacionamos los ejemplares analizados con la especie a la que pertenecen según la secuencia del COXI. Como podemos observar, la correlación hallada entre las especies encontradas según el marcador genético y la existencia del trazo blanco en el reverso del ala posterior, es total.

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA. CITAS DE LA ESPECIE EN LA PROVINCIA DE GUADALAJARA

Atribuimos todas las citas de ejemplares sin el trazo blanco a P. fabressei y las citas de ejemplares con el trazo a P. ripartii.

Citamos a P. fabressei en 31 nuevas cuadrados UTM de 10 x 10 km de lado, por lo que pasa de estar citada en 22 cuadrados en Guadalajara (GARCÍA-BARROS et al., 2004), a estar citada en 53. La distribución total conocida según GARCÍA-BARROS et al. (2013), era de 59 cuadrados. A estas cuadrados hay que añadir las publicadas con posterioridad de La Rioja (MONASTERIO-LEÓN et al., 2014), 1 cuadrado, y la región Valenciana (MONTAGUD et al., 2010), 15 cuadrados, por lo que en total la especie está citada en la actualidad en 106 UTM de 10 x 10 km de lado en toda la Península Ibérica. Tenemos que tener en cuenta que determinadas citas de la especie en el Sistema Ibérico de GARCÍA-BARROS et al. (2004) y MONTAGUD et al. (2010), pertenecerán a P. ripartii, si bien muy probablemente cohabitando con P. fabressei.

Citamos a P. ripartii en 13 cuadrados UTM de 10 x 10 km en la provincia de Guadalajara y una en Cuenca (Masegosa), siendo esta la primera cita de esta especie para la provincia de Cuenca.

A estas citas añadimos las siguientes cuadrados donde se cita P. fabressei en GARCÍA-BARROS et al. (2004) y nosotros carecemos de registros: 30TVL73, 30TWL20, 30TWL54, 30TWL70, 30TWL74, 30TXL10 y 30TWK97.

Mapas de distribución

Representamos en el mapa de la provincia de Guadalajara las citas propias y bibliográficas de P. fabressei en la Figura 3 y de P. ripartii en la Figura 4.

1. MORFOLOGÍA EXTERNA

VALIDEZ TAXONÓMICA DEL TRAZO BLANCO EN V4 DEL REVERSO DEL ALA POSTERIOR

Los resultados basados en el marcador genético COXI, nos muestran que todos los ejemplares analizados con el trazo blanco ancho en el reverso del ala posterior, pertenecen a la especie P. ripartii, mientras que todos los ejemplares sin trazo, o como máximo una fina línea vestigial de escamas blancas, son P. fabressei. Si a estos resultados añadimos la distribución geográfica de las citas de ejemplares con raya y ejemplares sin raya, que nos indica que al este del meridiano 2º 38’ 36’’ (UTM X=530.000.00) ambos morfotipos son simpátricos, mientras que al oeste de este meridiano, sólo aparecen ejemplares sin el trazo blanco (n = 160), concluimos lo siguiente:

P. ripartii, en la provincia de Guadalajara no habita al oeste del meridiano 530.000.00 P. fabressei nunca presenta el trazo blanco, a lo sumo, algunos ejemplares presenta una fina línea vestigial (Figuras 2 y 5) De la observación de ejemplares fotografiados y en colección, además de los 53 observados y fotografiados en Villacadima, encontramos que algunos ejemplares de P. fabressei pueden presentar un fino trazo vestigial y algunos ejemplares de P. ripartii, pueden presentar el trazo poco marcado, pero ambos trazos suelen ser diferentes, ya que el trazo en P. ripartii en los ejemplares que lo presentan muy poco marcado, sigue siendo ancho, mientras que en de P. fabressei es una fina línea, la mayoría de la veces imperceptible a simple vista. Además en P. ripartii, el trazo supera la línea de puntos llegando a la zona submarginal, mientras que la línea de P. fabressei, no suele superar la línea de puntos (Figuras 2 y 5)

COLOR DEL REVERSO ALAR

Analizados estadísticamente los componentes RGB del reverso del ala posterior de ambas especies, según la t de student, (Tabla 3) encontramos diferencias significativas en el componente rojo (R), no así en el verde (G) ni en el azul (B).

Los ejemplares de P. fabressei utilizados para hallar la estadística tienen un rango del Rojo entre 156 y 230, con una media de 189,72 (n=25). En los ejemplares de P. ripartii encontramos un rango entre 159 y 181, con una media de 172,78 (n=9). Comparando los valores del Rojo, encontramos un estadístico t de 3,96 y probabilidad de estadístico (dos colas) 0,4 %.

Para los valores verde y azul, la estadística no indica diferencias significativas en la comparación de las muestra (p dos colas > 0.025).

Si bien los datos muestran una generalidad con un mayor componente Rojo en P. fabressei, lo que le confiere un color más anaranjado, la variación no es extrapolable a todos los ejemplares, ya que algunos datos se solapan y hay P. fabressei muy similares a los ejemplares grisáceos de P. ripartii.

Aun así, una mayoría de los ejemplares analizados de las dos especies son separables por el color del reverso alar, siendo más anaranjado en P. fabressei y más grisáceo en P. ripartii. (Figura 5).

2. ECOLOGÍA Y BIOLOGÍA DE P. FABRESSEI.

FENOLOGÍA

Encontramos citas de la especie desde el 23 de junio al 23 de agosto. La especie vuela preferentemente en julio y agosto, indiferentemente de la zona y altitud.

PLANTA NUTRICIA

En todas las localidades estudiadas la planta nutricia ha resultado ser Onobrychis argentea subsp. hispanica.

HÁBITAT

Los requerimientos ecológicos de la especie no son en absoluto restrictivos, ya que aparece en todos los lugares donde hemos encontrado la planta nutricia, desde la vega del Henares a 750 m. hasta el culminar de la Sierra de Pela, en Hijes a 1.500 m. o en el Alto Tajo en Checa, a 1.600 m. Ocupa por tanto un importante gradiente de pisos bioclimáticos, desde el mesomediterráneo al límite inferior del oromediterráneo, en zonas con veranos frescos y húmedos (Alto Tajo) y zonas con veranos extremadamente cálidos y secos (Yeseras de Cogolludo). Geológicamente habita en terrenos calizos, preferentemente margas.

La planta nutricia aparece en claros de bosques, como quejigales, encinares, sabinares y pinares de Pinus nigra y Pinus sylvestris, mantenidos por herbívoros silvestres o ganado, así como en terrenos degradados ocupados por etapas de sustitución como tomillares y aliagares pastoreados.

P. fabressei aprovecha prácticamente cualquier planta con flor para libar. Es común observarla en Eryngium campestre, Sideritis incana, Lavandula latifolia, Scabiosa sp., Cirsiumsp. y en las yeseras de Cogolludo, sobre Gypsophila struthium, una de las pocas plantas floridas en agosto en los yesares.

Ciclo biológico y Lycaenidae encontrados, que entran en competencia en la flor de O. argentea.

Hemos estudiado el ciclo biológico de cuatro especies, que aun siendo todos diferentes, convergen en la espiga floral de Onobrychis argentea, cuando las orugas de todas ellas (a partir de L3), se convierten en competidoras por idéntico recurso, al alimentarse de las mismas flores al mismo tiempo. Estas son Polyommatus fabressei, Cupido osiris, Polyommatus thersites, y Glaucopsyche alexis. Hay otros Lycenidae polífagos citados sobre Onobrychis, como Polyommatus icarus y Lampides boeticus, pero si hay disponibles otros recursos cercanos como Medicago sativa en el caso de P. icarus o Astragalus alopecuroides en el de L. boeticus, hemos comprobado que no ponen sobre Onobrychis. G. alexis hiberna en fase de crisálida, naciendo en primavera y realizando la puesta en las flores de la esparceta en abril y mayo, a los pocos días de la puesta (entre 5 y 8 días) nacen las orugas que completan todo su desarrollo en algo menos de dos meses, siempre alimentándose de la flor y pupando a los pies de la planta.

C. osiris hiberna como oruga totalmente desarrollada en fase de prepupa, naciendo igualmente en primavera y con un desarrollo similar a G. alexis.

P. thersites tiene dos generaciones, la segunda hiberna en fase de oruga en L2, en primavera la oruga vuelve a alimentarse de los foliolos de las hojas basales de la planta, completando su desarrollo en las flores a partir de L3. Pupan bajo la planta y emerge el imago a los pocos días (de 7 a 10). Las hembras de esta primera generación realizan la puesta indistintamente en los foliolos de las hojas basales y en las flores. Las orugas nacen en más o menos una semana y dependiendo de dónde se ha realizado la puesta comenzarán alimentándose de la flor o del foliolo. A partir de L3 la oruga se desarrolla totalmente en la flor. Tras pupar bajo la planta nacerá la segunda generación que pone exclusivamente en los foliolos basales y en las ramillas secas de la planta. Las orugas tras nacer se alimentan del parénquima de los foliolos hasta la fase L2 en la que hibernan.

Finalmente, P. fabressei tiene un ciclo más diferenciado. Según GARCÍA-BARROS et al. (2013), el ciclo biológico de los primeros estadios es desconocido, por lo que lo describimos a continuación.

Los adultos emergen en verano, principalmente en julio. Las hembras ponen en las espigas florales secas, ya sin fruto y apenas sin cálices secos, ya que tanto unos como otros caen de la planta con mucha facilidad. La puesta se realiza entre las brácteas y el raquis. Las orugas se desarrollan en el huevo en una semana pero no nacen hasta la segunda quincena de octubre (n=10). Al nacer tras alimentarse con parte del corión del huevo, bajan a las hojas basales de la planta, donde se alimentan del parénquima del haz de los foliolos. Realizan unos pequeños círculos en el centro de éstos, dibujando unas máculas visibles que delatan su presencia. La primera muda la realizan a los diez días de media, hibernando en L2 a principios de noviembre. En primavera la oruga vuelve a alimentarse de los foliolos, subiendo a las flores en L3 donde completa su desarrollo y coincide con las orugas de las otras tres especies. Hemos llegado a encontrar orugas de tres de estas especies (G. alexis, P. fabressei y P. thersites) juntas en la misma espiga floral. Como podemos comprobar el ciclo biológico de P. fabressei es similar al descrito por MUÑOZ-SARIOT (2011) y GIL-T (2008), para P. violetae.

Asociación con hormigas

Las orugas de las cuatro especies fueron observadas atendidas por la especie Plagiolepis pygmaea en todos los rodales testigo.

Estudio del huevo. Morfología y parasitoides

Según nuestra muestra fotografiada con SEM (n=15), la media es 0.66 mm. Sobre la estructura coriónica, según nuestra muestra (entre fotografías SEM y digitales, n=40), en aproximadamente un 70% de los casos, los tubérculos del huevo de P. fabressei, están rodeados de 6 celdas y un 30% por 7 celdas.

El huevo es verde nada más ponerse, pasando a blanco en un par de días. Una semana antes de eclosionar oscurece volviéndose grisáceo.

Los huevos de P. fabressei son parasitados por Hymenoptera del género Trichogramma. En los huevos estudiados, este parasitismo afectó a un 20% de la muestra (n=50)

Descripción de la larva de primera edad

La larva es de color verde pálido (Figuras 6 y 7) y presenta en los segmentos abdominales (1º al 8º), en la zona dorsal dos sedas filiformes largas y dos cortas, en la zona subdorsal se encuentran dos cúpulas perforadas y una seda corta, estando más abajo el espiráculo. Finalmente encontramos las tres sedas laterales comunes a las especies de Lycenidae, siendo la central más larga que las laterales (Figuras 8, 9, 10, 11). No encontramos diferencias con la oruga de P. ripartii descrita en GARCÍA-BARROS et al. (2013)

Discusión

MORFOLOGÍA

Tras muchos años considerando que el trazo blanco en la cara ventral del ala posterior no tenía validez para separar los dos taxones estudiados, con la presente investigación se vuelve a poner en valor su presencia o ausencia. En un anterior trabajo sobre este carácter (PÉREZ-FERNÁNDEZ, 2008), para la especie P. fabressei en la provincia de Guadalajara, utilizamos una muestra de ejemplares con y sin raya, ya que estaba basado en la supuesta distribución alopátrica de las dos especies y que por tanto la única que habitaba en Guadalajara era P. fabressei, cuando en realidad la muestra utilizada incluía también ejemplares de P. ripartii.

La observación el 16-VII-2016 de un bebedero con 53 ejemplares de P. fabressei, en la localidad de Villacadima, en el noroeste de la provincia, nos ha ofrecido una visión amplia de la variabilidad de los ejemplares que habitan en la Sierra Norte, además de poder confirmar que en la zona no aparecen ejemplares con el trazo blanco, es decir no habita P. ripartii, una de las grandes incógnitas de este trabajo, ya que en esta zona (una isla geobotánica del Sistema Ibérico meridional) aparecen especies como Lysandra caelestissima, Erebia zapateri, Erebia epystigne o Polyommatus (Agrodiaetus damon), todas ellas características del Sistema Ibérico meridional, donde conviven con P. ripartii.

En contraposición, en una observación de otro bebedero en la localidad de Rillo de Gallo, en el este de la provincia, una semana antes, con una docena de ejemplares, comprobamos que la mitad presentaban el trazo y la otra mitad no.

Las citas que ofrecemos tiene una salvedad, no podemos ser taxativos en asegurar que todos los ejemplares sin raya de las zonas donde son simpátricas ambas especies, en el este de la provincia, pertenecen a P. fabressei, ya que en las poblaciones del norte de la Península Ibérica de P. ripartii, especialmente en Cataluña, hay un gran porcentaje de ejemplares que no presenta la raya blanca. Desconocemos si esto ocurre en la provincia de Guadalajara si bien los resultados genéticos todos los ejemplares sin raya han resultado ser P. fabressei.

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA

En la provincia de Guadalajara, la distribución de P. fabressei es muy amplia, siguiendo el patrón de su planta nutricia, que aparece en todas las zonas calizas cubiertas por formaciones vegetales climácicas o sus etapas de sustitución, desde los 700 m. aproximadamente, hasta los 1.600 m. Por el contrario el área de distribución de P. ripartii, es más restrictiva, ya que no hemos encontrado ejemplares con raya al oeste del meridiano UTM X= 530000. El centro y sur del oeste de la provincia es mucho más termófilo que el este, lo que podría ser una causa que explique esta distribución.

Estas distribuciones refrendan el trabajo de DE LESSE (1961b), donde se afirma que P. fabressei y P. ripartii conviven en la Península Ibérica en el Sistema Ibérico y explicaría las citas de DINCA et al. (2013). Igualmente vuelven a dar la razón y validez a las primeras citas de ambas especies en la provincia de Guadalajara de los entomólogos alcarreños M. Ortiz y J. Leyva, hace casi cuatro décadas.

Existe una antigua cita de P. fabressei limítrofe con la región de Madrid (VICENTE et al., 2009).

La presencia de esta especie en el este de la provincia de Madrid es perfectamente compatible con nuestro trabajo, ya que hay zonas calizas en el entorno de la localidad de Torrelaguna donde se dan todas las condiciones para que habite la especie, si bien la cita es más occidental.

PLANTA NUTRICIA

Onobrychis argentea está escasamente citado en la provincia según el proyecto Anthos (recopilación de las citas bibliográficas existentes (http://www.anthos.es/, consultado el 15 de septiembre de 2016), donde también encontramos escasas citas de O. matritensis, O. humilis y O. viciifolia. Hasta ahora la planta nutricia citada para P. fabressei en la mayoría de las referencias es O. viciifolia, u Onobrychis sin especificar, por ejemplo a nivel peninsular en MUNGUIRA et al. (1997), GARCÍA-BARROS et al. (2013) o MUÑOZ-SARIOT (2011). En nuestra opinión se debe tratar de un error de determinación botánico, ya que se trata de plantas similares y en las guías de flora para la península, cuando se citaba un Onobrychis se hacía referencia a O. viciifolia de manera genérica, generando esta confusión. Precisamente O. viciifolia es alóctona, importada de Asia para su cultivo, apareciendo exclusivamente en terrenos ruderales, cunetas, etc., nunca en espacios con vegetación natural climácica o etapas de degradación, donde el Onobrychis común en la zona estudiada es O. argentea. O. viciifolia es el Onobrychis más fácil de distinguir ya que tiene los foliolos anchos, de más de 5 mm., mientras que el resto de los Onobrychis ibéricos son menores de 4 mm.

Si bien en todas las poblaciones de plantas estudiadas, la especie ha resultado ser O. argentea, no podemos asegurar que A. fabressei sea monófaga en la provincia, ya que esto mismo se pensaba de A. violetae y recientemente hemos encontrado importantes poblaciones en la Sierra de Alcaráz, en Albacete, alimentándose de O. matritensis, especie también citada en Guadalajara, por lo que no descartamos a otros Onobrychis como nutricias de A. fabressei y P. ripartii, en la provincia.

Las observaciones realizadas en este aspecto son extensivas al resto de las especies de Lycenidae citadas comúnmente sobre Onobrychis viciifolia (Cupido osiris, P. therites, G. alexis, L. boeticus y P. icarus)

ESTUDIO DEL HUEVO

El huevo ha sido descrito recientemente en GARCÍA-BARROS et al. (2013), MUÑOZ-SARIOT (2011) y MUNGUIRA et al. (2015). Según este último, mide 0.67 mm de diámetro, no existiendo apenas diferencias con el de P. violetae, para el que dan una medida de 0.69 mm. Según MUÑOZ-SARIOT (2011), el huevo mide 0.7 mm., diferenciándolo claramente del huevo de P. violetae, para el que da una medida de 0.9 mm.

Nuestra mediciones se aproximan mucho a las de GARCÍA-BARROS et al. (2013) y MUNGUIRA et al. (2015), con una media de 0.66 mm. Hemos estudiado una pequeña muestra de 5 huevos de P. violetae, de la localidad de Riopar (Albacete) obteniendo una media de 0.60 mm, si bien con una importante variabilidad (desviación típica=63, 34 ), ya que el menor mide 0.51 mm y el mayor 0.67 mm, muy lejos de los 0.90 mm indicadas en MUÑOZ-SARIOT (2011).

MUÑOZ-SARIOT (2011), encuentra también diferencias en la estructura del corión, indicando que mientras que en P. violetae, cada tubérculo está rodeado por 6 ó 7 celdas, en P. fabressei, está rodeado por 4 ó 5, muy diferente de lo encontrado en nuestra muestra (n=40), ya que en la mayoría de los casos los tubérculos del huevo están rodeados de 6 ó 7 celdas, raramente de 4 ó 5. El patrón habitual es que el corión esté formado por hexágonos formados por celdas triangulares rodeando el tubérculo. Indicar que esta forma raramente es un carácter distintivo (Figuras 12 y 13).

Hemos tenido la ocasión de estudiar el huevo de las especies ibéricas del subgénero Agrodiaetus excepto el de Polyommatus damon, y podemos asegurar que son indistinguibles dentro de una variabilidad común a todos ellos.

CONSERVACIÓN

Debido a su distribución restringida y a que P. fabressei es endemismo ibérico, las dos especies estudiadas han aparecido citadas en listas rojas de Lepidoptera (VIEDMA et al., 1976, 1985) P. fabressei y P. ripartii no presentan problemas de conservación que no sean los comunes a toda la fauna invertebrada, principalmente la destrucción o modificación de sus hábitats naturales. Las dos especies, en general, no se distribuyen en poblaciones o colonias aisladas, sino que aparecen extendidas en sus áreas de distribución.

Debido a que su planta nutricia necesita claros de bosque o formaciones de matorral bajo mantenidos por herbívoros, el pastoreo de las zonas donde no hay ungulados es necesario para controlar la densidad del matorral.

Hemos comprobado que la espiga floral es especialmente palatable para las reses y en algunas zonas la presión ganadera hace casi imposible encontrar una flor cuando las orugas están terminando su desarrollo en ellas, por ello una excesiva carga ganadera puede resultar negativa. Los rodales de plantas no pastoreados por ganado y con presencia de corzos y conejos, presentan gran número de espigas florales secas con huevos, mientras que en los rodales pastoreados con rebaños es difícil encontrar espigas.

Agradecimientos

A Manuel Ortiz por la cesión de sus citas, la entrega desinteresada de ejemplares y los valiosos comentarios y charlas sobre el tema, a Cecilia Montiel por la cesión de sus citas fotográficas y los interesantes comentarios y correcciones, a Miguel L. Munguira por la revisión y comentarios del manuscrito, a Yeray Monasterio por la cesión de bibliografía inédita y citas de La Rioja, a Luis Ferrero por las molestias tomadas en investigar e identificar las plantas nutricias, a Miguel Ángel Alonso, bibliógrafo del Centro de Astrobiología del INTA, por conseguirnos con diligencia toda la bibliografía solicitada y a la Consejería de Agricultura de Castilla La Mancha por concedernos las autorizaciones necesarias para la recolección de ejemplares con fines científicos, dentro del Proyecto Científico de SHILAP.

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